武漢大學(xué)人民醫(yī)院陳謙學(xué)教授團隊、葉青松教授團隊、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院鄢博士團隊及友芝友醫(yī)療吳高博士團隊合作的研究成果，在美國神經(jīng)外科醫(yī)師協(xié)會（AANS）官方會刊Journal of Neurosurgery（世界神經(jīng)外科臨床研究領(lǐng)域影響排名第一的雜志）上發(fā)表。
通過多中心隊列研究，使用友芝友醫(yī)療CTCBIOPSY系統(tǒng)在膠質(zhì)瘤患者檢測CTC（循環(huán)腫瘤細胞），證明CTC及CTM（循環(huán)腫瘤微栓）為腦膠質(zhì)瘤臨床診斷和預(yù)后的獨立預(yù)測因子；在膠質(zhì)瘤患者腦脊液中檢測到大量CTC和CTM，為外周血的100倍左右；在腦膠質(zhì)瘤中首次證實，術(shù)后CTC水平為MRD（微小殘留病灶）評估的可行方法。
發(fā)表單位：武漢大學(xué)人民醫(yī)院、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院、友芝友醫(yī)療
發(fā)表雜志：Journal of Neurosurgery（IF：4.1）
研究目的：研究CTC和CTM在彌漫性膠質(zhì)瘤的診斷和預(yù)后預(yù)測價值
檢測方法：采用CTCBIOPSY檢測系統(tǒng)分離CTC和CTM
樣本來源：收集63例行全切除的彌漫性膠質(zhì)瘤患者，20例無腫瘤健康者作為對照
研究結(jié)果：
（1） CTC和CTM在膠質(zhì)瘤的診斷。以健康者CTC水平確定檢測閾值為2個CTC/5ml，膠質(zhì)瘤患者CTC陽性檢出率為84.13%（53/63），顯著高于健康者CTC水平，基于CTC診斷膠質(zhì)瘤的AUC（曲線下面積，衡量診斷性能優(yōu)劣指標）值為0.939。膠質(zhì)瘤中CTM的侵襲性和轉(zhuǎn)移性更強，檢出率為38.1%（24/63），基于CTM的診斷模型AUC值為0.69。
（2）探究CTC和CTM與外周免疫之間的相關(guān)性。分析顯示在彌漫性膠質(zhì)瘤或GBM（膠質(zhì)母細胞瘤）中未發(fā)現(xiàn)CTC水平或CTM與外周免疫狀況之間的相關(guān)性，而在CTM陽性患者的腦脊液中觀察到大量CTC和CTM，大約是外周血的100倍，其中CTM與親代腫瘤具有較高的相似性，推測CTM可能直接來源于親代腫瘤，產(chǎn)生于進入外周循環(huán)之前。
（3）探究CTC與膠質(zhì)瘤病理診斷的相關(guān)性。分析顯示CTC水平與WHO分級、亞型、IDH狀態(tài)、1p19q狀態(tài)和ATRX狀態(tài)顯著相關(guān)，CTC高水平代表著彌漫性膠質(zhì)瘤較差的預(yù)后，基于CTC水平診斷GBM的AUC值為0.768（閾值為4.5個/5mL）。此外，發(fā)現(xiàn)CTM與KPS（Karnofsky功能狀態(tài)量表）評分存在弱負相關(guān)性（r=-0.28，P<0.05）。
（4）探究CTC和CTM狀態(tài)與膠質(zhì)瘤患者的生存相關(guān)性。彌漫性膠質(zhì)瘤中CTC低水平患者的OS（p=0.038）顯著獲益，CTM陰性是彌漫性膠質(zhì)瘤和GBM（腦膠質(zhì)瘤）的良好預(yù)后因子，CTM陰性患者的PFS和OS均獲益。ROC曲線分析顯示，CTM預(yù)測彌漫膠質(zhì)瘤的AUC值為0.82（6個月生存）、0.75（1年生存）、0.6（2年生存），預(yù)測GBM的AUC值為0.81（6個月生存）、0.87（1年生存）、0.71（2年生存）。
進一步進行生存分析，從10個有統(tǒng)計意義的單因素中篩選出6個進行多因素分析，Cox比例風(fēng)險模型顯示，1p19q狀態(tài)（p=0.015）、KPS評分（p=0.01）、Ki-67指數(shù)（p=0.039）和CTM狀態(tài)（p<0.001）是膠質(zhì)瘤的獨立預(yù)后預(yù)測因子?；谶@些發(fā)現(xiàn)，研究者開發(fā)了一個基于6因素的彌漫性膠質(zhì)瘤生存預(yù)測模型，驗證準確性達0.823。在GBM中，Cox比例風(fēng)險模型顯示CTM和KPS評分是GBM的獨立預(yù)后預(yù)測因子，基于此研究者開發(fā)了一個簡單的無創(chuàng)預(yù)測模型，可以在患者術(shù)前快速評估患者結(jié)局，驗證準確性為0.770。
（5）探究術(shù)后CTC水平和CTM狀態(tài)與治療反應(yīng)的相關(guān)性。29例患者術(shù)前和術(shù)后均接受CTC檢測，結(jié)果顯示，術(shù)后CTM陽性比例和CTM水平顯著增加，手術(shù)本身可能會促進CTM進入外周循環(huán)；術(shù)后CTC陽性比例降低，但CTC檢測水平無明顯變化。進一步進行Pearson和Spearman相關(guān)性分析，顯示術(shù)后CTC水平與P53基因突變（p<0.001）和KPS評分（p<0.05）有強相關(guān)性，此外GBM中CTC水平與外周血淋巴細胞比例密切相關(guān)（P<0.05），因此利用術(shù)后CTC水平監(jiān)測患者的治療反應(yīng)和免疫狀況可能是一種有前景的新方法。
（6）探究術(shù)后CTC水平結(jié)合CTM狀態(tài)預(yù)測患者預(yù)后的價值。生存分析顯示，在彌漫性膠質(zhì)瘤中術(shù)后CTC高水平與較差的OS（p=0.039）顯著相關(guān)，在GBM患者中術(shù)后高CTC水平與較差的PFS（P=0.0017）和OS（P=0.00044）顯著相關(guān)。然而，手術(shù)可能導(dǎo)致CTM釋放從而降低CTM的預(yù)后價值，鑒于術(shù)前CTM的預(yù)后重要性，同時評估術(shù)后CTC水平和CTM可能比單獨評估CTC/CTM的可行性更高。將患者分為高CTC/CTM陽性組（n=11）和CTM陰性組（n=18），分析顯示CTM陰性組顯示出明顯的生存獲益（p=0.00067），在彌漫性膠質(zhì)瘤和GBM中高CTC/CTM陽性組均顯示出更差的PFS和OS。
進一步進行生存分析，從12個單因素中利用LASSO分析排除后，最終篩選5個因素（術(shù)后高CTC/CTM陽性狀態(tài)、1p19q共丟失、Ki-67指數(shù)、術(shù)后淋巴細胞比例、術(shù)后中性粒細胞/淋巴細胞比值）進行多因素分析，顯示術(shù)后高CTC/CTM陽性狀態(tài)、1p19q狀態(tài)是彌漫性膠質(zhì)瘤的獨立預(yù)后預(yù)測因素，基于5個因素構(gòu)建了高準確性的彌漫性膠質(zhì)瘤預(yù)后預(yù)測模型（驗證準確性達0.895）。
最后在研究討論部分，研究指出術(shù)后CTC水平可以預(yù)測患者的MRD，并首次在膠質(zhì)瘤提出使用術(shù)后CTC水平評估MRD為可行的方法。MRD概念來源于白血病，指誘導(dǎo)化療（或骨髓移植治療）后完全緩解，但患者體內(nèi)仍有白血病腫瘤細胞的痕跡。近年來，循環(huán)腫瘤生物標志物已被廣泛應(yīng)用于實體瘤，通過治療后的MRD來評估復(fù)發(fā)風(fēng)險，特別是膠質(zhì)瘤的彌漫性生長模式導(dǎo)致整個組織學(xué)切除困難，因此臨床上對MRD監(jiān)測有迫切需求。MRI（磁共振成像）已被證明不夠敏感，而外周循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）檢測率在彌漫性膠質(zhì)瘤中不令人滿意。在這項研究中，患者術(shù)后CTC水平顯示出明顯更好的生存獲益，當(dāng)與術(shù)后CTM狀態(tài)相結(jié)合時，CTC水平與患者生存率顯示出顯著的相關(guān)性。多項研究已經(jīng)表明CTC可用于評估放射治療效果，并且對神經(jīng)膠質(zhì)瘤的復(fù)發(fā)監(jiān)測優(yōu)于MRI。因此，CTC有助于監(jiān)測彌漫性膠質(zhì)瘤的腫瘤進展，為術(shù)后CTC水平檢測的進一步臨床應(yīng)用奠定了堅實的理論基礎(chǔ)，包括MRD評估、治療反應(yīng)和腫瘤進展監(jiān)測。